近場(cháng)光(guāng)學顯微鏡一(yī)般(bān)由載(zǎi)物台,聚光(guāng)照(zhào)明(míng)係(xì)統,物鏡,目鏡(jìng)和(hé)調焦(jiāo)機(jī)構(gòu)組(zǔ)成(chéng)。載(zǎi)物(wù)台(tái)用於承放被(bèi)觀(guān)察(chá)的物體。利(lì)用調焦(jiāo)旋(xuán)鈕(niǔ)可以驅動(dòng)調焦機構,使載(zǎi)物(wù)台作(zuò)粗調(tiáo)和微(wēi)調(tiáo)的升降(jiàng)運(yùn)動(dòng),使被(bèi)觀察(chá)物體調焦(jiāo)清(qīng)晰成(chéng)象。它的(dí)上層可(kě)以在(zài)水平(píng)麵內(nèi)沿作精密(mì)移(yí)動(dòng)和(hé)轉動,一般都把(bǎ)被(bèi)觀察(chá)的部(bù)位調放到(dào)視場(cháng)中(zhōng)心。
聚光照(zhào)明(míng)係統由燈源和聚(jù)光鏡(jìng)構成,聚光鏡(jìng)的(dí)功能是使更(gēng)多的(dí)光能(néng)集中到被觀(guān)察的部(bù)位(wèi)。照明燈的光(guāng)譜(pǔ)特性必須(xū)與顯微鏡的(dí)接(jiē)收(shōu)器的(dí)工作(zuò)波(bō)段相適(shì)應(yīng)。物鏡位於被(bèi)觀察物體附近,是(shì)實現*級放大(dà)的鏡頭。在(zài)物鏡轉(zhuǎn)換器(qì)上同(tóng)時(shí)裝著幾(jī)個(gè)不同(tóng)放大(dà)倍(bèi)率的物(wù)鏡,轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器就(jiù)可(kě)讓不同倍率的物鏡(jìng)進(jìn)入工作光路,物(wù)鏡的(dí)放大(dà)倍率(shuài)通(tōng)常為5~100倍。
物(wù)鏡是顯(xiǎn)微鏡(jìng)中對(duì)成(chéng)象質(zhì)量優(yōu)劣(liè)起決(jué)定性(xìng)作用的光學元件(jiàn)。常用(yòng)的有能(néng)對兩種顏色的(dí)光(guāng)綫(xiàn)校(xiào)正(zhèng)色差的消色(sè)差物鏡;質量(liáng)更(gēng)高的(dí)還有能(néng)對三種(zhǒng)色(sè)光校(xiào)正(zhèng)色差的(dí)復(fù)消(xiāo)色(sè)差(chà)物鏡(jìng);能保證物鏡(jìng)的整個像(xiàng)麵為平麵(miàn),以提高視(shì)場邊緣成(chéng)像質量(liáng)的(dí)平(píng)像場(cháng)物(wù)鏡(jìng)。高倍物(wù)鏡中(zhōng)多采用浸液物鏡,即在物(wù)鏡的下表麵(miàn)和標本片的上表(biǎo)麵(miàn)之間填充折射(shè)率為(wéi)1.5左右的液(yè)體,它能(néng)顯著的提高(gāo)顯微(wēi)觀(guān)察的分(fēn)辨(biàn)率(shuài)。
目(mù)鏡是位於人(rén)眼附(fù)近(jìn)實現第(dì)二(èr)級(jí)放大的鏡(jìng)頭,鏡(jìng)放(fàng)大倍(bèi)率通常(cháng)為5~20倍。按(àn)照(zhào)所能看到的視場大(dà)小,目(mù)鏡(jìng)可分為視場較(jiào)小的(dí)普(pǔ)通目(mù)鏡,和視(shì)場較(jiào)大的(dí)大(dà)視場(cháng)目(mù)鏡(或稱廣角(jiǎo)目鏡)兩(liǎng)類。
載物(wù)台和物(wù)鏡兩者(zhě)必(bì)須(xū)能沿(yán)物鏡光軸方向(xiàng)作(zuò)相對運(yùn)動以實現(xiàn)調(tiáo)焦,獲得清晰的(dí)圖像(xiàng)。用高倍物鏡(jìng)工作(zuò)時,容許(xǔ)的(dí)調焦(jiāo)範(fàn)圍往往(wǎng)小(xiǎo)於微(wēi)米(mǐ),所(suǒ)以顯微鏡(jìng)必須具備(bèi)為(wéi)精密的微動(dòng)調焦(jiāo)機構(gòu)。顯(xiǎn)微鏡(jìng)放大倍(bèi)率的(dí)限(xiàn)即有效(xiào)放大倍率,
近(jìn)場光學(xué)顯微鏡(jìng)的(dí)分辨(biàn)率(shuài)是指能被(bèi)顯微鏡清(qīng)晰(xī)區分(fēn)的(dí)兩(liǎng)個(gè)物(wù)點的(dí)zui小(xiǎo)間(jiān)距。分(fēn)辨(biàn)率和(hé)放(fàng)大倍(bèi)率是兩個不同的但又(yòu)互(hù)有的概念。
當(dāng)選用(yòng)的物(wù)鏡(jìng)數(shù)值孔徑不(bù)夠(gòu)大,即分(fēn)辨(biàn)率(shuài)不夠高時(shí),顯微鏡(jìng)不能分(fēn)清物體的微(wēi)細結構,此(cǐ)時即(jí)使過(guò)度地增大放大(dà)倍(bèi)率,得到的也隻(zhī)能(néng)是一個輪廓雖大(dà)但細(xì)節不(bù)清的圖(tú)像(xiàng),稱為無效放大(dà)倍(bèi)率。反之如果分辨率已滿(mǎn)足(zú)要(yào)求而放大倍(bèi)率不足,則顯微鏡雖(suī)已(yǐ)具備(bèi)分辨的(dí)能力,但(dàn)因(yīn)圖(tú)像太(tài)小而(ér)仍然不能被(bèi)人眼(yǎn)清晰視見(jiàn)。所以(yǐ)為了(liǎo)充(chōng)分(fēn)發(fā)揮顯(xiǎn)微鏡的(dí)分(fēn)辨能力,應(yīng)使(shǐ)數值孔徑(jìng)與(yǔ)顯(xiǎn)微鏡總放(fàng)大倍(bèi)率合理(lǐ)匹配。
聚光照(zhào)明係統(tǒng)是對(duì)顯(xiǎn)微鏡成像性(xìng)能(néng)有(yǒu)較(jiào)大影響(xiǎng),但又是(shì)易(yì)於(yú)被(bèi)使用者(zhě)忽視的環(huán)節(jié)。
近場光(guāng)學顯(xiǎn)微鏡(jìng)的(dí)功能(néng)是(shì)提(tí)供亮度足(zú)夠且均匀的物(wù)麵照(zhào)明。聚(jù)光(guāng)鏡發來的光(guāng)束應(yīng)能(néng)保證(zhèng)充(chōng)滿物鏡(jìng)孔徑角,否則就(jiù)不能(néng)充分利(lì)用物(wù)鏡所(suǒ)能(néng)達(dá)到的zui高分(fēn)辨(biàn)率(shuài)。為此(cǐ)目的,在(zài)
近(jìn)場光學顯微鏡中設有類(lèi)似(sì)照相(xiāng)物鏡中的,可以(yǐ)調節開孔大(dà)小的可變孔(kǒng)徑(jìng)光闌(lán),用來調(tiáo)節(jié)照明(míng)光束孔(kǒng)徑(jìng),以與物(wù)鏡孔徑角匹配。
改變照明方式,可以獲得亮背景上的(dí)暗(àn)物點(稱亮(liàng)視(shì)場照明(míng))或暗(àn)背(bèi)景上(shàng)的(dí)亮(liàng)物點(稱(chēng)暗(àn)視場(cháng)照明)等(děng)不(bù)同的觀(guān)察方式(shì),以(yǐ)便在(zài)不(bù)同情況(kuàng)下更好地發現和觀察(chá)微(wēi)細(xì)結構。